МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. «Оценка аутоиммунной составляющей при заболеваниях печени различной этиологии», 2010
Авторы: к.б.н. В. В. Немов, к.м.н. М. И. Попкова, Н. А. Шушляева, З. И. Никитина.
Предложен способ выявления при заболеваниях печени инфекционной и неинфекционной этиологии лиц с аутоиммунным компонентом. Предложено проведение скрининга и мониторинга состояния гуморального аутоиммунитета при заболеваниях печени различной этиологии на основе определения аутоантител к нативной ДНК и кардиолипину класса IgM, IgG с последующим вычислением коэффициента IgG/IgM, а также- исследование высоко- и низкомолекулярных циркулирующих иммунных комплексов как показателей иммунологической реактивности организма человека. При этом комплекс тестов на аутоиммунные показатели, предложенные IAIHG для диагностики разных типов АИГ (ANA, аnti-LKM1, anti-LC1) и ПБЦ (АМА), рекомендуется выполнять только с целью дифференциальной диагностики при гепатитах (циррозе) неясной этиологии и/или для дополнительной характеристики гепатоспецифических изменений при вирусных заболеваниях печени.
Разработанный алгоритм лабораторного обследования дает возможность выявить аутоиммунные изменения у больных с патологией печени вирусной этиологии, проводить оценку состояния аутоиммунитета в течение инфекционного процесса и при интерферонотерапии, верифицировать диагноз при гепатитах/циррозе печени неясной этиологии. А предлагаемые методы оценки аутоиммунитета доступны для массовых клинико-лабораторных исследований и позволяют повысить качество диагностических мероприятий, а также сократить затраты на использование дорогостоящих тест-систем.

2. Выявление редких трудно культивируемых форм возбудителей воспалительных заболеваний органов дыхания с использованием методов ПЦР, 2010.
В настоящих методических рекомендациях предложен первичный (скрининговый) способ выявления трудно культивируемых и редко встречающихся бактериальных и вирусных возбудителей заболеваний органов дыхания у детей и взрослых. Определен перечень редких микроорганизмов, способных вызывать целый ряд инфекционных заболеваний верхних и нижних дыхательных путей. Разработан оптимизированный алгоритм детекции этих возбудителей с использованием метода ПЦР – минипулов, позволяющий снизить себестоимость исследования в 3-4 раза. Методические рекомендации предназначены для врачей-лаборантов учреждений Роспотребнадзора и инфекционистов, аллергологов, пульмонологов, терапевтов, педиатров лечебно-профилактических учреждений Министерства здравоохранения и социального развития РФ.

3. "Молекулярно-генетические исследования при мониторинге энтеровирусной инфекции: 1. Дифференциация энтеровирусов геногрупп I и II методом полимеразной церной реакции/конформационного полиморфизма одиночных нитей ДНК", 2010

4. Новая медицинская технология «Комплексное ПЦР-обследование пациентов с инфекционно-аллергическими заболеваниями органов дыхания», 2008 г.
Разрешение на применение новой медицинской технологии ФС № 2009/084 от 21.04.09 г

5. Санитарно-вирусологический контроль водных объектов в системе эпидемиологического надзора за гепатитом А, 2008.
На основании данных литературы и опубликованных результатов собственных исследований авторов приведены сведения о роли водного фактора передачи в развитии эпедемического процесса гепатита А. Изложены эпидемиологические и лабораторные критерии контаминации водных объектов вирусом гепатита А. Представлены материалы о закономерностях циркуляции вируса гепатита А во внешней среде, в частности в воде. На основе совершенствования методик концентрирования и детекции возбудителя в концентратах составлен алгоритм санитарно-вирусологического контроля водных объектов на наличие вируса гепатита А. Предназначены для совершенствования санитарно-вирусологического контроля за водными объектами, что в конечном итоге приведёт к снижению заболеваемости ВГА.

6. «Эпидемиологический надзор и профилактика энтеровирусной (неполио) инфекции» (МУ 3.1.1.2363-08).
Утверждены 25 мая 2008 г., введены в действие с 1 июня 2008 г. Настоящие методические указания определяют организацию и порядок проведения эпидемиологического надзора и санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий в отношении энтеровирусных инфекций неполиомиелитной этиологии в постсертификационный период ликвидации полиомиелита с учетом накопленного за последние годы обширного материала о роли энтеровирусов в инфекционной патологии человека.

7. Молекулярно-генетические методы исследования в расшифровке вспышек кишечных инфекций вирусной природы: I. Метод конформационного полиморфизма одиночных нитей ПЦР-амплифицированных фрагментов ДНК ( PCR - SSCP -анализ) .
Разработано в ФГУН Нижегородском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н.Блохиной Роспотребнадзора, Н.Новгород, 2007.
Составители: Новикова Н.А. с соавт.
Метод предназначен для оценки штаммовой гетерогенности популяции установленного возбудителя кишечных инфекций вирусной природы и выявления генетически идентичных штаммов. Использование метода в рамках алгоритма эпидемиологического расследования позволяет обоснованно устанавливать эпидемиологические связи в очаге, как при локальных, так и распространенных вспышках кишечных инфекций вирусной природы.

8. Новая медицинская технология «Методы комплексной оценки аутоиммунного и деструктивно-воспалительного процесса при гепатитах различной этиологии».
Регистрационное удостоверение № ФС-2007/199 от 08.10.2007 г.
Разработано в ФГУН Нижегородском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н.Блохиной Роспотребнадзора, Н.Новгород, 2007.
Составители: Немов В.В., Паньшина Л.Ю., Шушляева Н.А., Мартынова Т.Г., Никитина З.И.
Медицинская технология представляет первичный (скрининговый) этап выявления среди больных гепатитами различной этиологии по комплексу показателей (уровни аутоантител к нативной ДНК изотипов IgM , IgG , аутоантител к кардиолипину изотипов Ig М, IgG и ферритина ) лиц с латентными аутоиммунными заболеваниями, больных с выраженной аутоиммунной составляющей гепатита вирусной или другой этиологии, а также может использоваться для мониторинга аутоиммунного и деструктивно-воспалительного процесса, нарушения метаболизма железа при заболеваниях печени.
Медицинская технология предназначена для врачей-инфекционистов, гепатологов, аллергологов-иммунологов лечебно-профилактических учреждений.

9. G[P] генотипирование ротавирусов с использованием полимеразной цепной реакции.
(Утв. ФС №0100/4446-07-34 от 27.04.07.)
Разработано в ФГУН Нижегородском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н.Блохиной Роспотребнадзора, Н.Новгород, 2007.
Составители: Новикова Н.А., Епифанова Н.В., Федорова О.Ф.
G[P]–генотипирование ротавирусов с использованием полимеразной цепной реакции является новым подходом к дифференциации штаммов ротавируса и включает впервые предложенный авторами способ идентификации субтипов Р[8]-генотипа вируса.
G[P]-генотипирование ротавирусов рекомендуется для мониторинга за циркуляцией геновариантов ротавируса с целью определения спектра G[P]-типов, идентификации доминирующих типов, установления временных и территориальных особенностей смены их доминирования, что имеет важное значение для теоретической оценки эффективности применения на конкретной территории разработанных ротавирусных вакцин.
Методические рекомендации предназначены для вирусологов, эпидемиологов, врачей-инфекционистов.

10. Оценка секретируемых факторов персистенции возбудителей воспалительных процессов респираторного тракта.
Разработано в ГУ Нижегородском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н.Блохиной, Н.Новгород, 2005.
Составители: Беляева Е.В., Ермолина Г.Б., Дегтева Г.К., Борискина Е.В., Меньков Н.В.
Представлены методы оценки антилизоцимной (АЛА) и антииммуноглобулиновой активности (АИА) бактерий - факторов способствующих персистенции возбудителей на слизистой оболочке респираторного тракта. Отмечено значение определения активности против IgA для возбудителей заболеваний верхних дыхательных путей, и активности против IgG - для культур из нижних дыхательных путей. Одновременная оценка АЛА и АИА может служить прогностическим признаком тяжести хронических заболеваний легких. Предназначено для врачей пульмонологических отделений стационаров, ЛОР врачей поликлиник.

11. Комплексное ПЦР-обследование на наличие возбудителей негонококковых урогенитальных инфекций женщин с гинекологической патологией и отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом.
Разработано в ГУ Нижегородском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н.Блохиной и Центральном НИИ эпидемиологии МЗ РФ, Н.Новгород, 2005.
Составители: Мазепа В.Н., Черневская О.М., Шипулин Г.А., Пузанова И.Н., Бруснигина Н.Ф., Орлова К.А., Скобло Л.Е., Махова М.А., Кленина Н.Н.
Представлен вариант комплексного ПЦР-обследования женщин с гинекологической патологией и отягощенным акушерским анамнезом, позволяющий одновременно выявлять четыре наиболее распространенных и значимых возбудителей негонококковых урогенитальных инфекций: Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealiticum, Cytomegalovirus в соскобах слизистой уретры, влагалища, цервикального канала. Предназначено для врачей, врачей-лаборантов.

12. Стратегия и тактика вакцинопрофилактики гепатита А.
Разработано в ГУ Нижегородском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н.Блохиной, Н.Новгород, 2005.
Составители: Быстрова Т.Н., Макарова Т.Г., Сергеева А.В., Попкова М.И., Ефимов Е.И.

На основе анализа данных литературы и собственных исследований по организации эпидемиологической и иммунологической эффективности вакцинопрофилактики гепатита А в г. Нижнем Новгороде дается оценка основных тактических этапов программы вакцинации. Предлагаются подходы к выбору оптимальной тактики специфической профилактики гепатита А на конкретной территории с учетом особенностей эпидемического процесса в современный период. Предназначено для врачей эпидемиологов, вирусологов.

13. Профилактика ВИЧ-инфекций и наркомании у подростков средствами образования.
Разработано в Приволжском окружном центре МЗ РФ по профилактике и борьбе со СПИД, Нижегородском институте развития образования, Областном наркологическом диспансере и Фонде изучения и исследований в области СПИД (AVERT), Н.Новгород, 2004.
Составители: Гладышева О.С., Носов Н.Н., Кузоватова Е.Е., Еделева Е.Г., Помазова Ю.В., Борисов И.Э., Абросимова И.Ю., Алексеева Е.В., Горьева Е.Ф., коллектив педагогов школы №62 Ленинского района г. Н.Новгорода.

14. Принципы отбора, хранения и транспортировки биологических субстратов для проведения ПЦР-диагностики бактериальных и вирусных инфекций.
Разработано в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии МЗ РФ и Центральном НИИ эпидемиологии МЗ РФ, Н.Новгород, 2002.
Составители: Мазепа В.Н., Черневская О.М., Шипулин Г.А., Бруснигина Н.Ф., Орлова К.А., Скобло Л.Е., Махова М.А., Кленина Н.Н.
В современную медицину активно внедряются методы выявления инфекционных агентов, основанные на детекции уникальных фрагментов их геномов. При использовании данных методов, таких как полимеразная реакция, лигазная цепная реакция, транскрипционная амплификация, на стадии забора материала для исследования необходимо соблюдение целого ряда требований. В данном пособии представлена информация как правильно забирать, хранить и транспортировать биологические субстраты для проведения ПЦР-диагностики бактериальных и вирусных инфекций. Предназначено для врачей, лаборантов-бактериологов, эпидемиологов.

15. ПЦР-ПДРФ выявление и дифференциация РНК энтеровирусов.
Методические рекомендации разработаны в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии им.академика И.Н.Блохиной МЗ РФ, Н.Новгород, 2001. Апробация метода проведена на базе вирусологической лаборатории ГЦСЭН в Нижегородской области.
Составители: Н.А.Новикова, Л.Н.Голицына, О.Ф.Федорова, Л.К.Домбровская.
В настоящих методических рекомендациях изложен ПЦР-ПДРФ (полимеразная цепная реакция - полиморфизм длины рестрикционных фрагментов) метод анализа геномной РНК энтеровирусов. Метод предназначен для обнаружения энтеровирусов в клиническом материале и объектах внешней среды, а также для идентификации полиовирусов и определения их вакцинного происхождения. Суть метода заключается в том, что в процессе "полугнездового" варианта ОТ-ПЦР амплифицируется общий для всех представителей рода Enteroviras оригинальный участок 5'-НТР генома, протяженность которого и наличие уникальных сайтов рестрикции позволяют проводить идентификацию РНК полио- и неполиовирусов. Разработанный метод ПЦР-ПДРФ обнаружения и дифференциации РНК энтеровирусов может быть использован в практике эпидемиологических и научных исследований, а также как подтверждающий тест при диагностике энтеровирусных инфекций.
Методические рекомендации предназначены для вирусологов, врачей-эпидемиологов и врачей-инфекционистов.

16. Метод комплексной оценки антибактериального и антитоксического популяционного иммунитета к коринебактериям дифтерии.
Методические рекомендации разработаны в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии им.академика И.Н.Блохиной МЗ РФ, Н.Новгород, 2001.
Составители: Немов В.В., Ивашкина С.Г., Никитина З.И., Деггева Г.К., Беляева Е.В., Ермолина Г.Б.
Разработан метод комплексной оценки напряженности иммунитета к коринебактериям дифтерии на основании дифференцированного исследования антитоксических антител класса IgG в сыворотке крови и секреторных IgA (sIgA) к корд-фактору (трегалозо-6,6'-димиколат) коринебак-терий дифтерии в слюне методом иммуноферментного анализа (ИФА), который позволяет проводить более адекватную оценку напряженности гуморального иммунитета к дифтерии, чем общепринятый метод определения суммарных антитоксических антител.
Предлагаемый метод предназначен для использования в широкой эпидемиологической и клинической практике (исследования колонизационной резистентности, эффективности вакцинопрофилактики, оценки различных вакцинных препаратов), а также для проведения научных исследований.
Методические рекомендации предназначены для врачей-эпидемиологов, иммунологов и научных сотрудников.

17. Метод определения функционального состояния иммунной системы детей раннего возраста: методические рекомендации.
Нижегородский НИИ эпидемиологии и микробиологии, Н.Новгород, 2000.
Составители: Талаев В.Ю., Лебедева И.Е.
Разработан метод, который позволяет определить функциональное состояние Т-лимфоцитов по характеру ответа клеток (пролиферация или апоптоз) на активацию, моделирующую действие антигена. Показано, что метод определяет характерный для периода новорожденности дефект реактивности Т-лимфоцитов и прогнозирует клиническое состояние детей раннего неонатального возраста. При иммунодиагностике новорожденных предлагаемый метод по своей чувствительности превышает общепринятый метод определения функционального состояния Т-лимфоцитов - реакцию бласттрансформации Т-лимфоцитов митогенами фитогемагглютинином и конканавалином А.
Метод предназначен для врачей лаборантов-иммунологов.

18. Стратегия и тактика вакцинопрофилактики гепатита В.
Разработано в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии МЗ РФ, Н.Новгород, 2000.
Составители: Алейник М.Д., Рябикова Т.Ф., Сергеева А.В., Княгина О.Н., Романова Т.В., Погодина Л.В.
На основе анализа данных литературы и результатов вакцинопрофилактики гепатита В, проведенной под руководством Нижегородского НИИЭМ в Чувашской республике и Нижегородской области, дается оценка отдельных этапов программы вакцинации.
Предлагаются подходы к выбору оптимальной тактики иммунизации для конкретной территории на фоне совершенствования традиционных противоэпидемических мероприятий.
Предназначено для врачей-организаторов здравоохранения, эпидемиологов центров СЭН и клинических эпидемиологов.

19. Использование бактериальных препаратов и продуктов лечебного питания.
Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени акад. И.Н.Блохиной, Н.Новгород, 2000.
Составители: Соколова К.Я., Соловьева И.В., Сидельникова М.Н.
Методические рекомендации посвящены описанию современного представления о процессе формирования микрофлоры человека в норме и патологии с учетом неблагополучной экологической обстановки и методов комплексной профилактики и лечения дисбактериозов с использованием эубиотиков, пре- и пробиотиков, продуктов лечебного питания, обогащенных защитными факторами, в сочетании с другими средствами, направленными на восстановление и нормализацию обмена веществ и гомеостаза.
Предназначено для врачей-педиатров, терапевтов, акушеров-гинекологов.

20. Полимеразная цепная реакция для выявления пилорического хеликобактера.
Разработано в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии МЗ РФ и Центральном НИИ эпидемиологии, Н.Новгород, 2000.
Составители: Мазепа В.Н., Бокарев А.Н., Шипулин Г.А., Щекотова Е.И., Перфилова К.М., Деречинская Е.Л., Орлова К.А., Махова М.А.
Пилорический хелиобактер относится к труднодиагнодиагносцируемым микроорганизмам. Он - анаэроб, требователен к составу питательных сред, его культивирование занимает 5-6 дней. В настоящем пособии представлен способ детекции хелиобактера, основанный на полимеразной цецной реакции, позволяющий проводить его выявление в различных типах клинического материала. Метод высокоспецифичный, чувствительный (выявляется 100 клеток в пробе), экспрессный (занимает 5-7 часов), существенно превосходит по данным параметрам остальные методы детекции хелиобактера.
Предназначено для врачей инфекционистов.

21. Препарат "Иммуноглобулин нормальный человека для внутривенного введения" в комплексном лечении недоношенных детей с инфекционной патологией.
Составители: Анастасиев В.В., Миловидова О.В., Захарьевская Н.С., Чуднер А.В., Кочеткова Т.А., Тимофеева Л.А.
Методические рекомендации разработаны в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии им. академика И.Н. Блохиной МЗ РФ, Нижегородским государственным предприятием по производству бактерийных препаратов (ИмБио) МЗ РФ, специалистами родильного дома №3 и детской больницы №27 «Айболит» (Н. Новгород), Н.Новгород, 2000.
В настоящих методических рекомендациях обобщен опыт работы авторского коллектива по использованию отечественного препарата "Иммуноглобулина нормального человека для внутривенного введения" для лечения новорожденных с инфекционной патологией, в том числе недоношенных из группы риска по внутриутробному заражению.
Разработаны показания к применению препарата, как в первые дни жизни в условиях родильного дома, так и на втором этапе выхаживания в отделении для недоношенных и маловесных детей. Определены оптимальные дозы и курсы введения. Материалы по изучению эффективности от применения препарата "Иммуноглобулина человека нормального для внутривенного введения" и проведенные катамнестические наблюдения дают основание рекомендовать препарат для включения в стандартный антиинфекционный комплекс при выхаживании новорожденных с инфекционной патологией. Методические рекомендации предназначены для врачей родильных домов и педиатрических стационаров.

22. Оценка адгезивных свойств коринебактерий дифтерии.
Разработано Нижегородским НИИ эпидемиологии и микробиологии МЗ РФ, 2000.
Составители: Е.В. Беляева, Г.Б. Ермолина, Г.К. Дегтева, В.В. Немов.
Представлены методы оценки адгезивности коринебактерий дифтерии - по прилипанию к клеткам буккального эпителия человека и по гемагглютинирующей активности. Второй метод позволяет оценивать адгезивные свойства не только нативных бактерий, но и выделенных из клеток отдельных поверхностных структур. Это дает возможность расширить характеристику коринебактерий по патогенным свойствам и идентифицировать структуры с адгезивной функцией для раскрытия механизмов взаимодействия бактерий с клетками организма человека.
Предназначено для микробиологов, врачей-бактериологов клиник и центров СЭН.

23. Метод ПЦР-диагностики в обследовании новорожденных и детей первого года жизни при риске внутриутробного инфицирования.
Методические рекомендации разработаны в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии МЗ РФ и Центральным НИИ эпидемиологии МЗ РФ (Москва), 2000.
Составители: Мазепа В.Н., Шипулин Г.А., Бруснигина Н.Ф., Черневская О.М., Орлова К.А., Скобло Л.Е.
В настоящих методических рекомендациях представлен высокочувствительный и специфичный метод детекции наиболее значимых и часто встречающихся возбудителей НУГИ (Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma Urealyticum, Cytomegalovirus, Herpes symplex I/II типов), основанный на ПЦР, позволяющий проводить выявление этих микроорганизмов у новорожденных и детей первого года жизни с риском ВУИ в различных образцах клинического материала в течение 5-7 часов. Методические рекомендации предназначены для научных сотрудников, врачей-лаборантов.

24. Ротавирусный гастроэнтерит. Противоэпидемиологические мероприятия.
Разработано в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии МЗ РФ, Н.Новгород, 1999.
Составители: Н.А.Новикова, Н.В.Епифанова, Т.В.Романова, Л.В.Макеева, М.В.Животовский.
На основе многолетнего опыта исследований систематизированы и дополнены положения, входящие в комплекс противоэпидемических мероприятий при ротавирусной инфекции, включающих применение для выявления больных ротавирусным гастроэнтеритом метода электрофореза РНК и использование при текущей дезинфекции эффективных в отношении ротавирусов, широко доступных и разрешенных к применению средств бытового назначения.
Предназначено для вирусологов, врачей-эпидемиологов, врачей-инфекционистов.